據資料記載，諾貝爾一生曾立過三次遺囑，現在有案可查的是后兩次。他的第二份遺囑寫于1893 年3 月14 日，其中提出：在他身后應將他遺產的大部分留作獎金，以支持各國杰出的科學家、文學家和致力世界和平的人士。同時，遺囑中還規定：遺產的另一部分（20％）由其親友22 人繼承。第三份遺囑寫于1895 年11 月27 日夜晚。他在這份遺囑中明確提出：要將價值3300 多萬瑞典克郎（合200 多萬英鎊）的財產作為基金，其每年利息分為5 份，以獎金的形式分別授予當年在物理學、化學、生理學或醫學、文學、和平事業中為人類作出卓越貢獻的人士，而不論性別。這份遺囑的確立，自然否定了前一份遺囑的合法性，也就剝奪了其親友們的財產繼承權。此外，在這份遺囑中，他還明確指定了兩個遺囑執行人，即瑞典企業家魯道夫·里爾雅克斯特和拉各納·索爾曼。諾貝爾真的立過這樣的遺囑嗎？他為什么要剝奪親友的財產繼承權呢？

　　遺囑的糾紛遺囑在諾貝爾死后發表，立即受到來自其親屬和瑞典社會各方面的壓力、刁難。散居在俄國、瑞典、法國等地的諾貝爾的親屬，后來還聯合起來，準備推翻這份遺囑或否定其最終的合法性，從而瓜分這筆龐大的遺產。一些瑞典人士甚至公開出面，批評這份遺囑忽略了瑞典的利益，沒有體現瑞典人民的愛國主義。人們認為，這份遺囑本身也是有缺陷的。首先，它沒有確認諾貝爾是哪國公民，這涉及到遺囑該由哪國來判定其合法性問題。后來，當遺囑執行人在與評獎單位協商未來基金會的法規細則時，又遭到瑞典科學院的抵制，從而再次引發了遺囑合法性之爭。最后達成了妥協：遺囑執行人答應由諾貝爾的親屬收購并繼續經營巴庫的石油企業；遺囑執行人答應將諾貝爾遺產中1897 年一年的利息由其親屬繼承等。